Taal :
SWEWE Lid :Teken |Registrasie
Soek
Encyclopedia gemeenskap |Encyclopedia Antwoorde |Vraag inhandig |Kennis van woordeskat |Oplaai kennis
Vorige 1 Volgende Kies Pages

Risien

Tegnologie definisies

Chinese naam: risien

Engelse naam: risien

Omskrywing te vervang: geïsoleerd van die ricinus lectin aktiwiteit met giftige proteïene. A en B deur die twee peptiedkettings aan mekaar verbind deur 'n paar van die disulfiedbindings, B kettings spesifiek kan kombineer met galaktose, A-ketting is 'n ribosoom deaktiveer vermoë.
Toegepaste Wetenskap: Biochemie en Molekulêre Biologie ('n onderwerp); suikers (twee vakke)

Die bogenoemde inhoude deur die Nasionale Wetenskap en Tegnologie Goedkeuring Komitee aangekondig

Chinese naam: risien

Buitelandse Naam: Risien

'N wetenskap: biochemie en molekulêre biologie

Toksisiteit: volwasse dodelike dosis van 7mg

Geïsoleerd van die ricinus lectin aktiwiteit met giftige proteïen, is een van die sterkste natuurlike gifstowwe. Is vol van gifstowwe, dwelm klas element, lectin proteïen bestaan ​​uit drie stowwe. Risien al soogdiere eukariotiese selle het giftige effekte, en nog baie meer giftig vir 'n paar kanker selle. Maak dit in medisyne aan die eerste keuse vir die moord op tumor selle van gifstowwe word.

Basiese oorsig

Castor (Ricinus communus), ook bekend as Hennep, kenaf, ens, is die genus Euphorbiaceae Ricinus, strooisuiker verbouing het 'n lang geskiedenis, is een van die wêreld se top tien olie gewasse, hoofsaaklik in Afrika en Asië, het 'n spesiale doel en 'n hoë ekonomiese waarde. China strooisuiker ryk aan hulpbronne, verbouing area van ongeveer 700 hektaar, strooisuiker jaarlikse produksie 340,000 ton, posisie eerste in die wêreld 2. Ricinuszaad (Ricinus) is strooisuiker strooi ryp vrugte, wat ongeveer 45% van die olie, kan die olie wat gebruik word as 'n belangrike chemiese rou materiaal, produksie van smeer olie, verf, oppervlak-aktiewe agent. Die oorblywende 50 persent na olie-ontginning van strooisuiker ete, ontvette maaltyd bevat ongeveer 35% proteïen, maar as gevolg van afval met 5% (wt%) van hoogs giftige ricin, kan nie gebruik word om 'n baie proteïen te maak . [1-2]

Risien (Risien) ricinuszaad is 'n giftige proteïen-inhoud van die saad gewig van 1% tot 5%. In 1887, Dixson eerste demonstrasie van ricinus vergiftiging wat veroorsaak word deur 'n proteïen. 1860, Stillmark gedetailleerde studie van hierdie gifstof, en het voorgestel dat die naam "Risien". Daarna, ricin het die spesiale fisiese en chemiese eienskappe en biologiese eienskappe veroorsaak dat baie biochemici belangstelling en besorgdheid. Studies het getoon dat ricin op eukariotiese selle van alle soogdiere het giftige effekte, en nog baie meer giftig vir 'n paar kanker selle. [3] maak dit in medisyne aan die eerste keuse vir die moord op tumor selle van gifstowwe word. Risien is 'n natuurlike medisyne een van die mees giftige proteïen, en sy muis LD50 van 7-10μg/kg, volwasse dodelike dosis van 7mg, die gemiddelde lid van die Risien is genoeg om 'n sel dood te maak. [4-5]

Risien deur die A, B twee kettings, met 'n sterk cytotoxicity, een keer in die sitosol, gifstof 'n ketting sal depurination katalitiese rol ribosoom, kan 1min lei tot ribosoom deaktiveer 1500 . Risien is wyd gebruik word in die mediese kanker Immuno Toxinen. China is 'n belangrike produsent van strooi, strooisuiker navorsing is 'n wêreldleier op die gebied. Met die toenemende vraag na kasterolie, strooisuiker ontvette ete 'n baie van die produksie, maar omdat dit bevat giftige stowwe, en beperk die strooisuiker benutting. [6]

Fisiese en chemiese eienskappe

Biochemiese samestelling

Risien is 'n heterodimeric glikoproteïen, is vol van gifstowwe, gifstof tipe hormoon, lectin proteïen bestaan ​​uit drie stowwe, deur 'n aantal van die verskillende tipes van proteïen polimeer samestelling van die formule: - [C8H8N2O2] n-het ook molekulêre gewig van ongeveer 64.000, is na berig 36000 ~ 85000. Is gevind in kristallyne vorme is gevind: kristallyne (twee soorte), B1-tipe, T3-, G-, D-, China en Japan het 'n bietjie strooisuiker E-tipe. Een van die mees giftige tipe D (virulent as ander vorme 10-20 keer). [7]

Die aminosuursamestelling van risien (massa persentasie) as volg: -1,5% lysine, histidien Kiekie -2,9% -2,0% glisien, isoleucine -3,6% -0,9% histidien, triptofaan -0,8%, leucine -3,8% -2,3% fenielalanien, treonien -2% -1,6% vel suur, aspartiensuur -10,3% -0,9% metionien, glutamiensuur -6,8% -12,7% arginine, serien -8,2%. So ricin arginine, aspartiensuur, serien en glutamiensuur inhoud van meer. [9] en die A-ketting van Trp 200, Arg 180, Glu 177, 123 en Tyr Tyr 80 in die aminosuurvolgorde van verskeie bewaar nie-polêre aminosure, aangesien hulle stabiliseer die aktiewe sentrum 'n sekere rol speel. As die A-ketting van lisieninhoud laag is, kan voorkom word ubiquitine en ubiquitine-gemedieerde proteolyse, studies het getoon geen effek van lisien verwyder A-ketting aktiwiteit, struktuur, stabiliteit, indien die Die bogenoemde bykomende vier lysine reste, sal 'n ketting agteruitgang koers aansienlik versnel. [10]

Risien is 'n wit poeier of kristal soliede, reukloos, onoplosbaar in alkohol, eter, chloroform, tolueen en ander organiese oplosmiddels, oplosbare in suur of sout oplossing, in 'n versadigde oplossing van ammoniumsulfaat kan ontketen. In kookwater of druk stoom behandeling kan risien vries denaturering, verlies van toksisiteit, maar in die geval van droë hitte denaturering klein. Castor ricin in die bedrag van 1% tot 5%, is daar 'n bedrag van 0,5% tot 15% van die berigte in die strooisuiker wortels, stingels, blare het 'n sekere inhoud. Verhit olie ontginning strooisuiker maaltyd Risien vorming aktiwiteit naby aan nul, terwyl die vorming van kasterolie onttrekking in koue ete Risien aktiwiteit was hoër, so Risien aktief in strooisuiker maaltyd is afhanklik van olie ontginning metodes. In vergelyking met die algemene proteïen, Risien aan hitte, suur en alkali stabiel, galaktose oplossing kan gestoor word vir 'n paar maande sonder verlies van aktiwiteit. [8]

Molekulêre ketting struktuur

Risien bestaan ​​uit twee polipeptiedkettings verbind deur disulfiedbindings kovalent, 'n glikoproteïen, Risien wat kovalent gebind suiker molekules wat bestaan ​​hoofsaaklik uit suiker mannose, glukose en galaktose. Risien is 'n strukturele analise voltooi deur Funatsu et al. [11] meer as twee peptiedkettings word A-ketting (Ricinchain A, RTA) en B-ketting (Ricinchain B, RTB). RTA is aktief ketting, maar is ook giftig ketting, is 'n glycosidase, relatiewe molekulêre massa van ongeveer 31.000. RTB is 'n kombinasie van die ketting, 'n lektien aktiwiteit, relatiewe molekulêre massa van ongeveer 34000, B ketting bevat twee galaktose bindend webwerwe, met die selle wat galaktose bindend glikoproteïene of gliko. Verbind deur 'n disulfide band tussen die twee. RTA en RTB het glycosylatie kant kettings. Risien is 'n strukturele analise afgehandel is deur die Funats ens. Die resultate het getoon: 'n ketting bevat ongeveer 263 aminosuurresidue, die eerste 10 reste van versuikerde ASN webwerf, dan is daar (G1cNAc) 2 (Man) 4 oligosakkaried kettings. RTA is 267 aminosure globulêre proteïen met agt α helices en agt β hoek en 'n paar random spoel bouvorm sulke eenhede, die aktiewe sentrum van Arg180; RTB is 'n 262 aminosuur proteïen Halter. Deur biochemiese en mutasie analise, kan dit ten minste drie RTB galaktose binding plekke op die selmembraan wees suikers soos galaktose en N-asetiel dopamien waterstofbinding. Cys259 van RTA en RTB se Cys4 deur 'n disulfide verband met die verlaat van die RTA RTB uitvoering in die selle 'n rol speel in die toksisiteit. Verskillende weergawes van die gifstof risien en sy aminosuurvolgorde is nie identies nie. Ramesh en ander geïsoleerde twee verskillende gifstof Risien D en E Risien, terwyl Cawley en ander geïsoleerde drie verskillende soorte giftige proteïen Ricin1, Ricin2 en Ricin3. Die isoelektriese punt van die proteïen uit die 5,9-8,8 reeks. [12]

'N ketting is maar net twee Lys residue, een in die N-terminale 4, 'n C-terminale geleë naby die toksisiteit van die A-ketting is baie belangrik. B-ketting is saamgestel uit 260 aminosuurresidue en vier intramolekulêre disulfide ketting, is daar twee oligosakkaried kettings (G1cNAc) 2 (Man) 6 en (G1 NACM) 2 (Man) 7, onderskeidelik verbonde aan die artikel 93 en 133 ASN reste, so 'n hoë molekulêre gewig dra as die 'n ketting. B ketting oligosakkaried kettings twee mannose reste kan reticuloendothelial selle, veral makrofage bindend, wat ryk is in mannose sel oppervlak reseptore, ricin prioriteit inname, wat biologiese funksies gifstowwe uitoefen belangrike rol. Die A-ketting (RTA) in die B-ketting (RTB), met die hulp van maklik deur selmembrane, skade aan 60S ribosomale subeenheid en proteïensintese inhibeer, wat lei tot seldood. [14] Risien toon die primêre struktuur, 'n ketting bestaan ​​uit 263 aminosuurresidue, molekulêre gewig 32.000, die aktiewe ketting, die eerste 10 reste ASN (asparagien) het glycosylatie, wat verband hou met (GLC Nac) 2 (Man) 4 oligosakkaried kettings. 'N ketting is maar net twee Lys oorblyfsel, die vierde een in die N-terminale, C-terminale een in die omgewing van hul giftige uitwerking op die A-ketting is noodsaaklik. B-ketting is saamgestel uit 259 aminosuurresidue volgorde bevat twee oligosakkaried kettings (GLC Nac) 2 (Man) en 8 (GLC Nac) 2 (Man) 7, onderskeidelik, en No 93 en No 133 op die twee 'n ASN reste gekoppel molekulêre gewig 34.000. Verskillende spesies van die gif ricin en sy variante is nie identies aminosuurvolgorde. [15]

A-ketting (RTA) en die B-ketting (RTB) kant kettings geglikosileerd, deur 'n disulfide brug tussen die RTA en RTB gekloon en uitgedruk in E. coli. 'N ketting is verdeel in drie strukturele domein. 1 is 'n N-terminale domein van 117 aminosuurresidue, ongeveer 40% van die ketting lengte van ses vou en 2 β α-heliks. 118-210 domein 2 stukkies is ook byna 40% van die aminosuurresidue , hoofsaaklik deur α-heliks 5, waarin E helix langste deur 20 aminosuurresidue (161-180 stukkies), die lengte van meer as vyf heliese, in die middel van die molekule en met 'n C-terminale bevooroordeeld gebuig oor die 30 grade , opvoustoel gebuig sodat glutamaat 177, 180 Arg na die molekulêre oppervlak aktiewe sentra. Die oorblywende 20% van die reste van die domein 3, wat hoofsaaklik uit ewekansige spoel, naby die C-terminus is ryk in hidrofobiese aminosure, kan dit risien A-ketting transmembraan vervoer speel 'n belangrike rol in die vorming van domeine 3 kant deel van die aktiewe sentrum, die ander kant van die B-ketting deur hidrofobiese interaksies met. [17]

Natuurlike A-ketting is 'n hoogs versuikerde proteïen, maklik geïdentifiseer en verwyder lewer selle, prokariotiese uitdrukking stelsel met behulp van rekombinante ricin A-ketting (recombinantRicintoxin 'n ketting rRTA) nie net kan die impak van die B-ketting skakel nie, maar ook glycosylatie nie plaasvind nie, maak die natuurlike A-ketting defekte. [18] 1992 Morris et al, Universiteit van Chicago studie is getrek in ricin 267 aminosuurresidue, 222 (ongeveer 83%) kan individueel verwyder word sonder die invloed van die A-ketting erkenning en katalitiese aktiwiteit nie, maar kan jy verwyder korter fragmente, 'n fragment wat slegs 20 aminosure, en die res 5, 2 klein stukkies van aminosure. Sommige proteïen interne hidrofobiese oorblyfsels, sowel as deel van die α-heliks en β-vou reste kan ook verwyder word, wat die A-ketting het 'n baie sterk buigsaamheid, wat kan vergoed vir 'n sekere mate van strukturele verandering, en sodoende die handhawing van sy biologiese aktiwiteit. B-ketting is 'n kombinasie van die ketting molekulêre gewig van ongeveer 34.000, die 259 aminosuurresidue, ruimtelike struktuur soos handgewigte, elke kant het 'n galaktose-bindende site. B-ketting bestaan ​​uit twee strukturele domein, hierdie twee gebiede het 'n hoë homologie. 1-135 domein van die aminosuur samestelling van die aminosuursamestelling 1,136-262 domein 2, van die struktuur van hierdie twee dele 32% identies aan die aminosuurvolgorde van elke afdeling kan verdeel word in α, β, γ onderbou koppelingshistoon domein, en λ, sub-struktuur wat gevorm word deur die interaksie tussen die hidrofobiese kern, die twee-dimensionele B-ketting bouvorm van die domein 1 en domein 2 van die α sub-domein van γ met suiker bindend aktiwiteit te stabiliseer, wat daarop dui dat die B-ketting deur 'n galaktose bindende aard met die polipeptied deur gene duplisering en fusion te vorm, met die onafhanklike evolusie van risien A-ketting gene fusion ricin te vorm. [13] ricin B ketting met 'n kombinasie van suiker, hoofsaaklik deur waterstofbindings, wat ook die spesifisiteit vir suiker bouvorm bepaal, terwyl ricin B ketting interaksie met suiker loci relatief klein is, wat ook met ricin B ketting galaktose bindend kapasiteit met 'n lae konsekwentheid. B ketting wat tot 25% van die spiraal area, dit het 'n lektien aktiwiteit. Twee ente van die B-ketting oligosakkariede (GicNac) 2 (Man) en 8 (GicNac) 2 (Man) 7 mannose reste met reticuloendothelial selle, veral makrofage bindend sel oppervlak wat ryk is in mannose suiker reseptore, prioriteit inname risien, wat gifstowwe speel 'n belangrike rol in biologiese funksies. [20]

Suiwering

Risien is wyd gebruik word om "georiënteerde dwelms." Voorbereiding (dit wil sê, Immuno Toxinen), sal gebruik word in biologiese plaagdoders ricin rigting ontvang het uitgebreide aandag en navorsing, dus, ontginning en suiwering van risien het belangrike belangrikheid van navorsing oor die onttrekking koers van risien metodes te verbeter, en vir die massa-produksie onder baie kenners is 'n belangrike deurlopende navorsing. [11]

Risien van ricinuszaad of maaltyd uittreksel ru uittreksel ricin belangrikste metodes is: asynsuur onttrekking; fosfaat buffer onttrekking; ammoniumsulfaat neerslag en dialise metode. Met die ontwikkeling van geen-tegnologie, het ook die gebruik van kloning sukses behaal Risien is aangemeld nie. [22]

(A) asynsuur onttrekking metode, geweeg bedrag van strooi koek in 'n mortier stamper (stamper in 'n ys bad ricin om te verhoed dat in die proses van variasie vergruizing), voeg 'n paar eter om af te vet. Week vir 20 min, gefiltreer met vier lae van gaas uit te filtreer vet eter. Die ontvette strooisuiker koek droog by kamertemperatuur, met ysasynsuur is deurdrenk by 4 ℃ vir 20 h, gefiltreer met gaas ru-ekstrak. [23]

(2) Suur onttrekking buffer: fosfaat gebufferde sout geweek met strooisuiker koek monsters is behandel vir 20 h met poliëtileen glikol water deur 5000r/min centrifuge 15min, was die supernatant gemeet ricin inhoud. [24]


Vorige 1 Volgende Kies Pages
Gebruiker Review
Nog geen kommentaar
Ek wil om kommentaar te lewer [Besoeker (54.236.*.*) | Teken ]

Taal :
| Gaan kode :


Soek

版权申明 | 隐私权政策 | Kopiereg @2018 Wêreld ensiklopediese kennis